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方案概述

前言：

知母，是百合科植物知母的干燥根茎。其适应性强，多生于干旱山坡、草原或沙地，喜疏松沙壤土，耐寒抗旱，我国河北、山西等地分布广泛。其主治热病烦渴、肺热燥咳、阴虚燥咳、骨蒸潮热及内热消渴等症，亦可用于肠燥便秘、阴虚火旺之证。具有清热泻火、生津润燥、滋阴降火之功效。在现行《中国药典》中，对知母的显微特征、薄层色谱鉴别、水分和总灰分等检查项目有明确规范，确保其药用质量。在2025版《中国药典》修订草案中，新增了对知母中芒果苷及新芒果苷的定量测定方法，以更精准地控制其有效成分含量，推动了药材的标准化应用。

本次实验参考了2025年版《中国药典》知母的修订草案公示稿，采用英国365集团官网高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器进行检测。实验结果显示，系统适用性测试，目标峰周围无杂峰，芒果苷峰理论塔板数远高于药典要求6000，满足试验要求。对照品新芒果苷保留时间重复性RSD为0.047%，峰面积重复性为0.139%，芒果苷保留时间重复性RSD为0.094%，峰面积重复性为0.151%。供试品新芒果苷保留时间重复性RSD为0.092%，峰面积重复性为0.284%，芒果苷保留时间重复性RSD为0.171%，峰面积重复性为0.312%。含量测试供试品中新芒果苷和芒果苷的含量共计为1.38%，满足于药典要求的不少于1.20%。以上数据均满足药典方法对于仪器的要求。

关键词：知母；新芒果苷；芒果苷；高效液相色谱法；紫外检测器。

1.实验方法

1.1 仪器配置

表1高效液相色谱系统配置清单

序号	名称	数量
1	LC3200系列高效液相色谱仪	1
2	P3210B二元高压梯度泵	1
3	UV3210 紫外检测器	1
4	CT3400全温度柱温箱	1
5	AS3210全自动进样器	1

1.2 实验材料及辅助设备

乙腈：色谱纯；

甲醇：色谱纯；

磷酸：优级纯；

新芒果苷标准品；

芒果苷标准品。

1.3 测试条件

表2 高效液相色谱条件

色谱柱	Nova Atom SC18 4.6×250mm 5μm色谱柱
流速	1mL/min
柱温	40 ℃
流动相	A相:乙腈 B相：0.2%磷酸溶液
波长	258nm
进样量	10μL

表3 流动相洗脱程序

时间（min）	A相	B相
0	7	93
7	7	93
10	13	87
26	13	87
26.1	7	93
30	7	93

1.4 溶液配制

1.4.1对照品溶液

取新芒果苷对照品、芒果苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含新芒果苷75μg、芒果苷50μg的混合溶液，即得。

1.4.2供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）0.2009g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理40分钟（功率400W，频率40kHz），放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.结果与讨论

2.1 系统适用性

图1 对照品测试谱图

表4 对照品测试数据

名称	保留时间(min)	峰面积(mAU*s)	理论塔板数
新芒果苷	15.318	2224.363	148229
芒果苷	19.386	2474.023	70805

说明：由上述表格可见，芒果苷峰理论塔板数远高于药典要求6000，目标峰周围无杂峰，满足系统适用性试验要求。

2.2 对照品重复性测试

图2 6针对照品测试色谱图

表5 6针对照品测试数据

化合物名	保留时间(min)	峰面积(mAU*s)
新芒果苷	15.318	2224.363
	15.312	2228.227
	15.307	2225.266
	15.312	2228.537
	15.300	2229.382
	15.300	2233.026
平均值	15.308	2228.134
RSD（%）	0.047	0.139

表6 6针对照品测试数据

化合物名	保留时间(min)	峰面积(mAU*s)
芒果苷	19.386	2474.023
	19.372	2479.455
	19.358	2483.052
	19.360	2484.505
	19.343	2482.377
	19.337	2482.02
平均值	19.359	2480.905
RSD（%）	0.094	0.151

说明：由上表数据可知，对照品新芒果苷保留时间重复性RSD为0.047%，峰面积重复性为0.139%，芒果苷保留时间重复性RSD为0.094%，峰面积重复性为0.151%。

图3 6针供试品测试色谱图

表7 6针供试品测试数据

化合物名	保留时间(min)	峰面积(mAU*s)
新芒果苷	15.351	1144.155
	15.343	1143.313
	15.337	1145.332
	15.328	1146.515
	15.320	1152.317
	15.314	1144.678
平均值	15.332	1146.052
RSD（%）	0.092	0.284

表8 6针供试品测试数据

化合物名	保留时间(min)	峰面积(mAU*s)
芒果苷	19.479	835.932
	19.459	833.603
	19.440	830.696
	19.424	829.463
	19.407	829.723
	19.389	830.174
平均值	19.433	831.598
RSD（%）	0.171	0.312

说明：由上表数据可知，供试品新芒果苷保留时间重复性RSD为0.092%，峰面积重复性为0.284%，芒果苷保留时间重复性RSD为0.171%，峰面积重复性为0.312%。

2.3 知母测试结果

图4 供试品测试色谱图

表9 供试品测试数据

名称	保留时间(min)	峰面积(mAU*s)	理论塔板数
新芒果苷	15.351	1144.155	145885
芒果苷	19.479	835.932	70449

说明：由对照品进样10μL测试新芒果苷75μg/mL峰面积为2224.363，芒果苷50μg/mL峰面积为2474.023，供试品进样10μL新芒果苷峰面积为1144.155，芒果苷峰面积为835.932，称样量0.2009g，定容体积50mL，计算可知供试品中新芒果苷和芒果苷的含量共计为1.38%，满足于药典要求的不少于1.20%。

3.结论

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