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方案概述

前言：

气相色谱技术在三七总皂苷中树脂残留物的检测方面发挥着至关重要的作用。三七总皂苷作为血栓通等心脑血管药物的核心原料，其纯化工艺普遍采用大孔吸附树脂。但该过程会引入正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯等有害有机溶剂残留。这些残留物对人体具有潜在毒性，因此必须建立灵敏、准确的检测方法进行严格监控。

本篇文章参考了最新版《中国药典》，采用英国365集团官网气相色谱仪GC6100配置FID检测器搭配全自动顶空进样器对三七总皂苷样品中树脂残留进行检测。

关键词：三七总皂苷；溶剂残留；气相色谱；FID检测器；顶空。

1.实验方法

1.1 仪器配置

英国365集团官网GC6100气相色谱仪

表1气相色谱系统配置清单

序号	名称	数量
1	GC6100气相色谱仪	1
2	FID检测器	1
3	全自动顶空进样器	1

1.2 实验材料及辅助设备

对照品：自购有证正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1，2-二乙基苯和二乙烯苯标准溶液，避光密封冷藏;

N,N-二甲基甲酰胺；

载气：高纯氮气；

氢气发生器；

空气发生器；

全自动顶空进样器；

顶空瓶：玻璃顶空瓶（20mL）。

1.3 测试条件

1.3.1 顶空进样器参考条件

加热平衡温度：90℃；

加热平衡时间：30min；

进样阀温度：110℃；

传输线温度：120℃；

进样体积：1.0mL（定量环）。

1.3.2 气相色谱仪参考条件

色谱柱：FFAP毛细管色谱柱，30m×0.25mm×0.25μm；

程序升温：柱初始温度60℃，保持16分钟，再以20℃/min速率升温至200℃，保持2分钟；

柱流量：1.0 mL/min；

进样口温度：240℃；

检测器温度：300℃；

空气流量：300mL/min；

氢气流量：40mL/min;

尾吹流量：20mL/min;

分流进样：分流比2：1。

1.4 溶液配制

1.4.1 对照品贮备液；

精密称取正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1，2-二乙基苯、二乙烯苯对照品适量，加N,N-二甲基甲酰胺制成每1mL中分别含有20μg、4μg、20μg、20μg、20μg、20μg、20μg、20μg的溶液，作为对照品贮备液。

1.4.2 混合标准使用溶液

精密吸取对照品贮备液2ml，置50ml量瓶中，加25%N，N-二甲基甲酰胺溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置20ml顶空瓶中，密封，即得。

1.4.3 检出限测试标准溶液

精密吸取对照品贮备液2ml，置500ml量瓶中，加25%N，N-二甲基甲酰胺溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置20ml顶空瓶中，密封，即得。

2.结果与讨论

2.1 标样定性试验

图1 空白溶剂色谱图

图2 混合标准使用溶液色谱图

表2 混合标准使用溶液色谱参数

化合物名	保留时间（min）	峰面积	理论塔板数	分离度
正己烷	2.052	92.903	9532	12.922
苯	3.136	12.547	22458	15.086
甲苯	4.270	52.145	65784	22.422
对二甲苯	6.178	47.608	56890	15.275
邻二甲苯	8.011	37.963	55150	24.434
苯乙烯	12.151	26.830	57649	30.670
1，2-二乙基苯	17.152	39.951	307766	45.030
二乙烯苯-1	21.241	7.698	2149971	2.807
二乙烯苯-2	21.405	3.104	2095121	N/A

说明：由上述谱图可见，各色谱峰之间能很好分离，分离度大于1.5，满足实验分析需求。

2.2 重复性测试

图3 混合标准使用溶液重复性测试谱图（n=5)

表3 混合标准使用溶液色谱参数

化合物名	保留时间RSD（%）	峰面积RSD（%）
正己烷	0.022	0.903
苯	0.017	0.898
甲苯	0.023	1.169
对二甲苯	0.027	0.926
邻二甲苯	0.031	0.859
苯乙烯	0.021	0.967
1，2-二乙基苯	0.015	0.849
二乙烯苯-1	0.004	1.288
二乙烯苯-2	0.003	1.035

说明：混合标准使用溶液连续进样5针，峰面积的RSD≤1.5%。

2.3 检出限

图4 检出限测试标准溶液色谱图

表4 检出限测试标准溶液色谱参数

化合物名	保留时间（min）	峰面积	信噪比	检出限（μg/mL）	定量限（μg/mL）
正己烷	2.056	6.895	669.459	0.36×10-3	1.19×10-3
苯	3.138	1.344	118.687	0.40×10-3	1.35×10-3
甲苯	4.273	5.321	562.650	0.42×10-3	1.42×10-3
对二甲苯	6.177	4.901	350.389	0.68×10-3	2.28×10-3
邻二甲苯	8.010	4.023	219.546	1.09×10-3	3.64×10-3
苯乙烯	12.147	2.757	105.090	2.28×10-3	7.61×10-3
1，2-二乙基苯	17.150	4.221	251.686	0.95×10-3	3.18×10-3
二乙烯苯-1	21.243	0.902	111.438	2.15×10-3	7.18×10-3
二乙烯苯-2	21.408	0.374	45.794	5.24×10-3	1.75×10-2

说明：以信噪比（S/N）为3确定检出限（LOD），以信噪比（S/N）为10确定定量限（LOQ），检出限及定量限均符合标准要求。

2.4 样品试验

分别精密称取样品约0.1g（0.1017g、0.1026g、0.1023g），置20ml顶空瓶中，精密加入25% N，N-二甲基甲酰胺溶液5ml，密封，摇匀，即得。

图5 三份样品溶液测试谱图

图6 样品溶液与对照品溶液对比谱图

说明：样品中正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1，2-二乙基苯和二乙烯苯均未检出。

3.结论

本方法采用英国365集团官网气相色谱仪GC6100配置FID检测器搭配全自动顶空进样器对三七总皂苷样品中树脂残留进行检测。实验结果显示，各色谱峰之间能很好分离，分离度大于1.5，满足实验分析需求。该方法的重复性、检出限试验结果均符合要求，测试样品中正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1，2-二乙基苯和二乙烯苯均未检出，结果正常。说明了该方法配备英国365集团官网GC6100仪器满足对三七总皂苷样品中树脂残留的检测需求。

4．注意事项

实验中使用的溶剂和标准样品溶液配制及样品前处理过程中应在通风柜中进行，操作时应按规定要求佩戴实验室防护用品，避免接触皮肤和衣物。

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